ОВОПУЛЬС

01.09.2026

Нарушение сигналинга тиреоидных гормонов под действием амиодарона приводит к сбоям пространственного формирования тканей и эпителиально-мезенхимальной динамики при развитии задних конечностей куриного эмбриона

DOI: http://dx.doi.org/10.1016/j.zool.2026.126349

Авторы: Vaishnav, Juhi; Balakrishnan, Suresh.

Организации: Dr. Vikram Sarabhai Institute of Cell and Molecular Biology, Faculty of Science, The Maharaja Sayajirao University of Baroda, Вадодара, Гуджарат, Индия; Department of Zoology, Faculty of Science, The Maharaja Sayajirao University of Baroda, Вадодара, Гуджарат, Индия.

Публикация: Zoology (Jena, Germany), 178–179:126349, 7 сентября 2026 г.

Язык: английский.

Аннотация

Тиреоидные гормоны (TH) регулируют эмбриональный рост и ремоделирование тканей, однако их роль в морфогенезе конечностей птиц остаётся изученной не полностью. Авторы предположили, что вызванное амиодароном подавление сигналинга тиреоидных гормонов может нарушать развитие задних конечностей куриного эмбриона посредством изменения ключевых сигнальных путей пространственного формирования тканей и эпителиально-мезенхимальных процессов на ранних стадиях формирования зачатка конечности. Оплодотворённым яйцам кур породы род-айленд красный на 0-е сутки эмбрионального развития вводили in ovo в воздушную камеру фосфатно-солевой буфер в качестве контроля либо амиодарон в концентрации 1 мМ. Эмбрионы исследовали на 2-е, 4-е и 10-е сутки развития, а часть эмбрионов оставляли до вывода для оценки сформировавшегося фенотипа. Развитие задних конечностей оценивали с использованием морфологических, гистологических, молекулярных, клеточных и биохимических методов. Анализ включал определение экспрессии генов и белков, оценку апоптоза и клеточного цикла, системный анализ сигнальных путей и исследование показателей ремоделирования тканей. Воздействие амиодарона приводило к устойчивым деформациям конечностей, выявляемым после вывода, а на 10-е сутки эмбрионального развития наблюдалось нарушение организации хондрогенной ткани. Молекулярный анализ выявил повышение экспрессии SHH, FGF8, WNT3, HOXA10 и CASP3. Одновременно происходило подавление экспрессии генов, связанных с формированием идентичности задней конечности, мезенхимальным состоянием клеток и эпителиально-мезенхимальным переходом (EMT), включая TBX4, PITX1, FGF10, GLI3, SNAIL и WNT7A. Результаты анализа белков и проточной цитометрии указывали на нарушение согласованного взаимодействия между апикальным эктодермальным гребнем (AER) и мезенхимой. Наблюдалось увеличение популяции эпителиальных клеток, положительных по CDH1, при одновременном снижении SNAIL. Также отмечалось усиление апоптоза, ассоциированного с активированной, или расщеплённой, каспазой-3. Это подтверждалось увеличением площади окрашивания Nile Blue, свидетельствующим о повышенной клеточной гибели. Изменения протеомного профиля, снижение активности ацетилхолинэстеразы и уменьшение содержания гидроксипролина дополнительно указывали на нарушение процессов клеточной дифференцировки и созревания внеклеточного матрикса. В совокупности результаты исследования свидетельствуют о том, что нормальный сигналинг тиреоидных гормонов, вероятно, играет важную роль в координации пространственного формирования тканей, поддержании баланса между эпителиальным и мезенхимальным состоянием клеток, обеспечении их выживания и созревании внеклеточного матрикса в процессе развития задних конечностей куриного эмбриона. Воздействие амиодарона связано с нарушением этих взаимосвязанных программ эмбрионального развития, что может лежать в основе наблюдаемых структурных дефектов конечностей.

Насколько чувствителен куриный эмбрион к вмешательству в гормональную регуляцию на самых ранних стадиях развития?

Исследователи использовали амиодарон для нарушения сигналинга тиреоидных гормонов. Препарат вводили in ovo в воздушную камеру в самом начале эмбрионального развития, после чего изучали формирование задних конечностей. Последствия оказались длительными: нарушения, возникшие во время эмбриогенеза, приводили к стойким деформациям конечностей после вывода. На молекулярном уровне изменялась целая сеть генов, управляющих пространственной организацией тканей. Повышалась экспрессия SHH, FGF8, WNT3, HOXA10 и CASP3, тогда как активность TBX4, PITX1, FGF10, GLI3, SNAIL и WNT7A снижалась. Особенно интересны изменения эпителиально-мезенхимальной динамики. Увеличивалось количество CDH1-положительных эпителиальных клеток и снижалась экспрессия SNAIL — одного из регуляторов перехода клеток в мезенхимальное состояние. Одновременно усиливался апоптоз, нарушалось взаимодействие между апикальным эктодермальным гребнем и мезенхимой, изменялось формирование хрящевой ткани и созревание внеклеточного матрикса. Тиреоидный сигналинг участвует в координации пространственного формирования тканей, клеточной пластичности, выживания клеток и созревания внеклеточного матрикса. Его нарушение на раннем этапе способно превратить кратковременное молекулярное воздействие в постоянное изменение фенотипа после вывода.

OVOPULSE — экспертная платформа IN OVO

Количество показов: 33
Автор:  Vaishnav, Juhi; Balakrishnan, Suresh