ОВОПУЛЬС

03.07.2026

Разработка рекомбинантного вектора на основе вируса энтерита уток, экспрессирующего VP1 вируса гепатита уток DHAV-3 и гены prM/TE вируса Тембусу уток

DOI: http://dx.doi.org/10.1016/j.psj.2026.107501

Авторы: Jia, Wenfeng; Wu, Zhi; Tan, Aiqi; Cheng, Yuting; Zhou, Qingkang; Zhu, Shanyuan; Wang, Anping.

Публикация: Poultry Science, 105(11):107501, 27 июля 2026 г.

Язык: английский.

Аннотация

Вирус энтерита уток (Duck enteritis virus, DEV) является перспективным вирусным вектором для разработки вакцин. В предыдущем исследовании с использованием технологии HDR-CRISPR/Cas9 был создан рекомбинантный вирус rDEV-DHAV-VP1 путём вставки гена VP1 вируса гепатита уток типа 3 (DHAV-3) в межгенную область UL27/UL26 вакцинного штамма DEV. Полученный рекомбинантный вирус продемонстрировал хорошую генетическую стабильность и иммуногенность. В настоящем исследовании тот же подход был использован для вставки гена EGFP в межгенные области US7/US8 и LORF11/UL55 вакцинного штамма DEV. Среди исследованных сайтов вставки наиболее высокий уровень экспрессии EGFP наблюдался при его локализации в области US7/US8, за которой по уровню экспрессии следовал сайт UL27/UL26. На основе ранее созданного rDEV-DHAV-VP1 в локус US7/US8 дополнительно были встроены гены премембранного белка (prM) и укороченного белка оболочки (TE) вируса Тембусу уток (Duck Tembusu virus, DTMUV). В результате был получен бивалентный рекомбинантный вирус rDEV-VP1-prM/TE. Рекомбинантный вирус характеризовался кинетикой роста, сопоставимой с таковой родительского вируса, при этом сохранялись эффективная экспрессия встроенных генов и их высокая генетическая стабильность. Полученные результаты показывают, что система HDR-CRISPR/Cas9 является эффективным инструментом для создания стабильных рекомбинантных векторов на основе DEV и представляет собой перспективную платформу для разработки мультивалентных вакцин против основных вирусных заболеваний уток.

Можно ли превратить вирусный вектор в конструктор, в который последовательно добавляются антигены сразу нескольких инфекций?

Китайские исследователи продолжают развивать DEV — вакцинный вирус энтерита уток — как платформу для рекомбинантных вакцин. С помощью HDR-CRISPR/Cas9 ранее в участок UL27/UL26 был встроен VP1 вируса гепатита уток DHAV-3. Теперь исследователи протестировали дополнительные участки генома DEV для размещения новых антигенов. Наиболее эффективным оказался локус US7/US8. Именно туда в уже созданный rDEV-DHAV-VP1 дополнительно встроили гены prM и укороченного белка оболочки вируса Тембусу уток. Так был получен рекомбинантный rDEV-VP1-prM/TE, одновременно несущий антигены двух разных вирусов. Важно, что добавление нескольких генетических конструкций существенно не нарушило репликацию DEV. Встроенные гены стабильно сохранялись и эффективно экспрессировались. Особенно интересен переход от поиска одного «безопасного места» для вставки антигена к картированию генома вектора по эффективности различных сайтов интеграции. При этом работа пока демонстрирует прежде всего технологическую возможность создания такого вектора. Для оценки его реальной вакцинной ценности необходимы исследования иммуногенности и экспериментального заражения против DHAV-3 и DTMUV. CRISPR превращает разработку рекомбинантных вакцин из поиска случайно удачной конструкции в элементы инженерного проектирования. Выбор оптимальных локусов, последовательное добавление антигенов и сохранение стабильности вектора открывают путь к созданию одной мультивалентной платформы против нескольких инфекций птицы.

OVOPULSE — экспертная платформа IN OVO

Количество показов: 69
Автор:  Jia, Wenfeng; Wu, Zhi; Tan, Aiqi; Cheng, Yuting; Zhou, Qingkang; Zhu, Shanyuan; Wang, Anping