Ветеринария

07.10.2026

Стоит ли экономить на вакцине против ньюкаслской болезни?

 Ключевые слова: вирулентный вирус ньюкаслской болезни VII генотипа, вакцины против ньюкаслской болезни, эффективность вакцин против ньюкаслской болезни.

Благодарность: Работа выполнена за счет средств ФГБУ «ВНИИЗЖ» в рамках научно-исследовательских работ по теме «Ветеринарное благополучие».

Конфликт интересов: Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Введение

Вспышка ньюкаслской болезни (НБ), вызванной высоковирулентным вариантом вируса — это катастрофа для птицехозяйства. Возбудитель высококонтагиозен, поражает различные органы и ткани, включая нервную систему птицы, и обуславливает летальность до 100%. Например, ущерб от эпизоотии НБ в США, охватившей в 2003 г. шесть штатов, составил более 200 млн USD [1]. Следующая вспышка произошла в 2018 г., когда распространение инфекции было зафиксировано в трех штатах и государственные субсидии на борьбу с НБ составили около 72 млн USD [2]. Исследования выделенных в то время изолятов вируса показали их генетическое, в том числе антигенное, отличие от ранее известных [2].

Варианты вируса НБ, вызвавшие в 90-х эпизоотии в Европе и Азии, были отнесены к новому генотипу VII [3; 4]. В Российской Федерации вирус генотипа VII впервые вызвал вспышку в 2006 г. Выделенный изолят был определен как генотип VII d и показал наивысший индекс интрацеребральной патогенности: ICPI=2,0 [5; 6]. Пик распространения вариантов вируса НБ генотипа VII в России был отмечен в 2019 г., когда было зарегистрировано 17 неблагополучных пунктов [7]. Выделенные изоляты вируса НБ были генетически гомогенны и относились к новому субгенотипу VII L, впервые описанному в 2017 г. в Иране. До 2019 г. высоковирулентные изоляты ВНБ, выделяемые на территории РФ, относились к субгенотипам VII d, VII h и VII i. В 2020 г. новый для России ВНБ субгенотипа VII.1.1 (VII L) продолжил свое распространение и было зарегистрировано 15 неблагополучных пунктов. В 2021 г. зарегистрировано пять вспышек НБ в стадах домашних кур в Центральном, Дальневосточном и Уральском федеральных округах. В 2022 г. на территории РФ установлено 16 неблагополучных пунктов в шести регионах, а в 2023 г. — 13 неблагополучных пунктов по НБ в семи регионах страны. Таким образом, возбудитель НБ распространен практически на всей территории страны. С 2019 г. по настоящее время выявленные вирусы НБ отнесены к субгенотипу VII L. По данным серомониторинга, проведенного специалистами ФГБУ «ВНИИЗЖ» в 2023‒2024 гг., антитела к вирусу НБ были выявлены у птиц дикой фауны в разных регионах России. Это также является свидетельством обширного природного резервуара возбудителя НБ [9].

Будучи РНК-содержащим, вирус НБ обладает высокой изменчивостью [10], что объясняет филогенетическое разнообразие вариантов возбудителя. Неоднородность свойственна и отдельным популяциям вируса. Например, известно, что по признаку размера «бляшек» (локальных поражений, которые образуют на клеточном монослое единичные инфекционные вирионы), природные популяции вируса НБ гетерогенны [11; 12; 13]. При этом изолированные крупно- и мелкобляшечные клоны вируса могут сохранять свои фенотипы [11]. Это указывает на возможность независимого развития дочерних субпопуляций в природе, т.е. на патотиповое и антигенное разнообразие вируса, которое на практике обуславливает снижение иммуногенности вакцин против гетерологичных штаммов [14; 15; 16; 17].

Однако все известные в настоящее время варианты вируса НБ относятся к серотипу I семейства Paramyxoviridae и демонстрируют перекрестные иммунологические реакции [17], т.е. имеют общее происхождение и содержат в определенных пропорциях общие антигены (коиммуногены). Этим можно объяснить усиление поствакцинального иммунного ответа на гетерологичные штаммы при увеличении прививной дозы живых вакцин [17; 18].

Рассмотренный материал позволяет предположить, что эффективность специфической профилактики НБ будет зависеть от конкретного сочетания двух составляющих: антигенного соответствия между полевым и вакцинным штаммами и патотипа (вирулентности) полевого штамма. В этой связи считали целесообразным изучить влияние величины прививной дозы на антигенное и протективное действие живой вакцины против НБ из штамма «Ла Сота» в отношении актуального для России высоковирулентного варианта вируса НБ генотипа VII.

 

Вирус. Для контрольного заражения применили вирус НБ VII генотипа штамм Saratov субгенотипа VII L или 7.1.1 по другой классификации. Вирус вводили цыплятам в дозе 7,1 lg ЭИД₅₀ перорально в объеме 0,5 см³.

Птица. Эксперимент проводили на серонегативных цыплятах в возрасте 10 суток (75 голов), выведенных из СПФ-яйца (фирма VALO BioMedia, Sachsenring 11, 27711 Osterholz-Scharmbeck, Germany). Работу с птицей выполняли в соответствии с ГОСТ 33215-2014.

Иммунизация птицы. Подготовили три образца вакцины, содержащие в прививном объеме (1,0 см3) заданные прививные дозы (lg ЭИД₅₀): 5,7; 6,7; 7,7. Были образованы четыре группы птиц по 15 голов — три опытные и одна контрольная. Каждой дозой вакцины орально иммунизировали отдельную группу. Контрольных птиц не прививали.

Серологические исследования. Сыворотки крови птиц исследовали в РТГА. Использовали коммерческий набор для выявления антител к вирусу НБ производства ФГБУ «ВНИИЗЖ». Определяли титры антител к вирусу НБ. Положительными считали образцы сыворотки, титр которых составлял не менее 1 : 8. Реакцию проводили с гомологичным антигеном «Ла-Сота» и гетерологичным антигеном Saratov.

Обработка данных. Использовали стандартные методы обработки выборок варьирующих переменных (х). Определяли средние оценки и стандартные отклонения средних. Статистические различия экспериментальных оценок считали существенными при p≤0,05. Специальные приемы обработки данных описаны в тексте. Вычислительные операции выполняли в приложении Microsoft Excel.

 

Таблица 1

Показатели антигенного действия вакцины «ВНИИЗЖ-НБ «Ла-Сота», установленные в РТГА через 21 сутки после иммунизации соответственно способу вакцинации, прививным дозам и антигенам, использованным в реакции

Способ вакцинации	Прививная доза (D, lg ЭИД50)	Антиген «Ла-Сота» (гомологичная реакция)		Антиген Saratov (гетерологичная реакция)
		Kb	log2T±s c	K	log2T±s
Пероральный	5,7	0,3	6,00±0,94	0,4	3,00±1,15
	6,7	0,8	5,38±0,63	0,8	3,63±0,74
	7,7	1,0	6,00±0,82	0,9	3,60±0,70
Окулярный	6,7	1,0	5,90±0,66	1,0	3,70±0,82
Контрольa		0	<2,00	0	<2,00

Примечания: a) в группе контроля птицу не вакцинировали;

b) K — коэффициент иммунизации (K=g/m, где g — количество положительных реакций из m-числа тестированных образцов сывороток, m=10);

c) log₂T±s — средние логарифмические титры и стандартные отклонения по выборке из g-числа положительно реагирующих образцов сывороток.

Представленные в табл. 1 результаты демонстрируют, что увеличение пероральной дозы вакцины (lg ЭИД50) от 5,7 до 7,7 lg обусловило возрастание показателя K от 0,3 до 1,0 с гомологичным и от 0,4 до 0,9 — с гетерологичным антигенами, тогда как средние титры (log₂) в выборках положительных реакций были статистически равными и не зависели от дозы. При окулярной вакцинации доза 6,7 lg ЭИД₅₀ обусловила значение K=1 и величину (log₂) среднего титра 5,90±0,66 c гомологичным антигеном и 3,70±0,82 — с гетерологичным. Здесь следует подчеркнуть, что во всех случаях показатели гомологичных реакций по t-критерию были всегда статистически (р<0,05) выше гетерологичных.

Между штаммами «Ла-Сота» и Saratov определили оценку односторонней антигенной родственности (r) по Архетти и Хорсфалу. Использовали значения средних титров, установленных в гомо- (hom) и гетерологичной (het) реакциях с сыворотками, полученными после применения наибольшей прививной дозы. Искомая оценка составила величину log2 r=log2 Thet−log2 Thom=3,60−6,00=(−2,4), в арифметической размерности значение r=2(−2,4)=0,18, или r=18%. С учетом статистики измерения титра сывороток в РТГА (‘s=s / √g) ошибка значения log2 r составила ‘sr=√(‘s2 het+’s2 hom)=0,34 log2 , и показатель антигенной родственности штаммов был определен в границах (%) 15≤r≤25.

Оценка протективного эффекта вакцины. Через 21 сутки п/в во всех группах провели заражение вирулентным вирусом НБ штамма Saratov. В течение 12 суток после заражения (L=12) все птицы проходили клинический осмотр. Для количественного представления результатов клинических наблюдений использовали принцип условных единиц. В качестве прототипа приняли методику оценки индекса интрацеребральной патогенности вируса НБ (взято из “The Intracerebral Pathogenicity Index Test for Avian. Orthoavulavirus Type 1”. SOP: VI.438 Edition 10 (07.02.2019)).

Ежедневно учитывали количество здоровых (a), клинически больных (b) и павших птиц (c). Специфичность падежа подтверждали наличием характерных для НБ патологоанатомических признаков. В случае если больная птица имела признаки параличей и не могла принимать пищу, то ее считали погибшей. По окончании опыта в каждой группе определяли накопленные величины: ∑a; ∑b; ∑c. Далее вычисляли клинический показатель (V): 

V=((Ʃb / 2)+Ʃc) / Ln.

Величина ∑a в расчетах не участвовала, но использовалась для контроля правильности проведенных вычислений путем проверки равенства: ∑a+∑b+∑c=Ln. Оценка V на клиническом уровне характеризовала вирулентность штамма вируса, установленную как на контрольной (не иммунной), так и на иммунизированной птице. Величина V могла принимать значение в границах 0≤V≤1 при условии: V=0 — клиническое проявление НБ отсутствует; V=1 — все птицы погибли через сутки после заражения. 

На основании клинической оценки контрольной группы (V₀) и аналогичных оценок, установленных в вакцинированных группах (V), для каждой испытанной прививной дозы определяли показатель протективного эффекта вакцины (Е): E=(V₀ −V) / V₀.

Значение E характеризовало поствакцинальную защиту птиц в границах 0≤E≤1 при условии: E=0 — защита отсутствует; E=1 — защита абсолютная.

Полученные результаты приведены в табл. 2.

Таблица 2

Протективный эффект (Е) вакцины «Ла-Сота» (ВНИИЗЖ), испытанной в разных иммунизирующих дозах против вируса НБ генотипа VII штамма Saratov

Из данных табл. 2 следует, что использованный для заражения штамм вируса НБ субгенотипа VII L Saratov показал себя как высоковирулентный. Летальность у инфицированных птиц через 8 суток составила 100%. Клинический показатель имел оценку V₀=0,539. Эффективность протективного действия вакцины при пероральном (or) применении полностью зависела от величины прививной дозы. Соответственно возрастающим испытанным дозам (D_or, lg ЭИД₅₀): 5,7; 6,7 и 7,7 значения Е распределились следующим образом: 0,577; 0,763 и 0,974 (при максимально возможном значении E=1). Коэффициент корреляции между указанными величинами D и Е составил оценку k=0,998.

Окулярная прививка в дозе 6,7 lg ЭИД₅₀ обусловила показатель протективного эффекта Е=0,784

Считаем, что использованный в настоящей работе метод оценки протективного эффекта вакцины (E=(V₀−V) / V₀) характеризовал защитное действие препарата, ориентированное конкретно на данную комбинацию вакцинного и заражающего штаммов вируса. Установленная в эксперименте связь величины прививной дозы вакцины и протективного эффекта против гетерологичного штамма свидетельствует о возможности «компенсации» антигенного отклонения вируса. Другими словами, умножение количества прививаемого вируса в целом ведет и к возрастанию количества коиммуногенов, презентирующих иммунную систему птицы, что функционально расширяет антигенный спектр вакцины.

Окулярная прививка в дозе 6,7 lg ЭИД₅₀ показала абсолютный иммунный охват в подопытной группе птиц (K=1) и высокий показатель антигенного действия в гомологичной системе (log₂T=5,90±0,66). Однако протективный эффект в данном случае составил оценку Е=0,784 (78%).

По результатам проведенного эксперимента была построена регресссионная модель связи вида ‘D=5,031 E+2,819, где ‘D — ожидаемое значение пероральной прививной дозы (lg ЭИД₅₀) для заданной величины Е. Модель позволила определить, что для получения минимально допустимого протективного эффекта, соответствующего значению Е=0,9 (90%), величина прививной дозы вакцины «ВНИИЗЖ-НБ  «Ла-Сота» против вируса НБ генотипа VII штамма Saratov должна быть не менее 7,35 lg ЭИД₅₀. Однако это теоретический прогноз.

В практическом аспекте это означает, что если в птицехозяйстве используют вакцину «ВНИИЗЖ- НБ «Ла-Сота» и в данном регионе присутствует вероятность распространения антигенно измененного варианта вируса НБ, то птица должна быть привита дозой 7,7 lg ЭИД₅₀ (использование десятикратной окулярной (интраназальной) дозы при вакцинации птицы методом выпаивания препарата допускается соответствующей инструкцией по применению вакцины, где указано, что окулярная (интраназальная) доза составляет 6,7 lg ЭИД₅₀). Это, конечно, связано с некоторым увеличением расходов на ветеринарное обслуживание (ветпрофилактику), но стоит ли экономить на вакцине в ущерб здоровью птицы?

 

Резюме

На цыплятах в возрасте 10 суток исследовали антигенное и протективное действие живой вакцины против ньюкаслской болезни (НБ) из штамма «Ла- Сота» против высоковирулентного вируса НБ субгенотипа VII Lштамма Saratov. Вакцину испытывали пероральным (or) и окулярным (ok) способами в заданных дозах (D). Были испытаны D_or (lg ЭИД₅₀/см³ ): 5,7; 6,7; 7,7 и D_ok (lg ЭИД₅₀/0,05 см³ ): 6,7 ЭИД₅₀/см³ . Каждой дозой иммунизировали отдельную группу цыплят (n=15). Дополнительно, в том количестве, была сформирована группа контроля. Через 21 сутки после вакцинации в РТГА исследовали сыворотки крови птиц с антигенами «Ла-Сота» (hom) и Saratov (het). 

Определяли коэффициенты иммунизации в группах, (K=g/m, где g — количество положительных реакций m — число тестируемых образцов сывороток) и средние логарифмические титры антител к вирусу НБ (T, log₂ ). Далее проводили заражение вирулентным вирусом, и в каждой группе в течение 12 суток (L) учитывали количество здоровых (a), клинически больных (b) и павших птиц (c). 

В результате вычисляли клинические показатели (V=((Ʃb / 2)+Ʃc) / Ln). На основании показателя контрольной группы (V0 ) и аналогичной величины подопытной группы (V) определяли оценку протективного эффекта испытанной дозы вакцины (E=(V₀ −V) / V₀ ). 

Установили, что соответственно возрастанию оральных прививных доз полученные показатели распределились: Khom: 0,3; 0,8; 1,0; T_hom: 6,00±0,94; 5,38±0,63; 6,00±0,82; K_het: 0,4; 0,8; 0,9; T_het: 3,00±1,15; 3,63±0,74; 3,60±0,70; E: 0,577; 0,763; 0,974. Оценки после испытания окулярной дозы составили: K_hom=1,0; K_het=1,0; T_hom=5,90±0,66; T_het: 3,70±0,82; E=0,784.

Литература

1. Kapczynski D.R., King D.J. Protection of chickens against overt clinical disease and determination of viral shedding following vaccination with commercially available Newcastle disease virus vaccines upon challenge with highly virulent virus from the California 2002 exotic Newcastle disease outbreak. Vaccine. 2005; 23(26): 3424?3433.

2. Ferreira H.L., Reilley A.M., Goldenberg D., Ortiz I.R.A., Gallardo R.A., Suarez D.L. Protection conferred by commercial NDV live attenuated and double recombinant HVT vaccines against virulent California 2018 Newcastle disease virus (NDV) in chickens. Vaccine. 2020 Jul 22; 38(34): 5507?5515.

3. Lomniczi B., Wehmann E., Herczeg J., Ballagi-Pordány A., Kaleta E.F., Werner O., Meulemans G., Jorgensen P.H., Manté A.P., Gielkens A.L., Capua I., Damoser J. Newcastle disease outbreaks in recent years in western Europe were caused by an old (VI) and a novel genotype (VII). Arch Virol. 1998; 143(1): 49?64.

4. Alexander D.J., Aldous E.W., Fuller C.M. The long view: a selective review of 40 years of Newcastle diseases research. Avian Pathol. 2012; 41 (4): 329?335.

5. Пчелкина И.П., Манин Т.Б., Чвала И.А. Характеристика изолята вируса ньюкаслской болезни, выделенного в Амурской области в 2006 г. // Сборник трудов 6-й Всерос. науч.-практ. конф. с междунар. участием. 2007. Т. 2. С. 44, 45.

6. Сарбасов А.Б., Ирза В.Н., Репин П.И., Старов С.К., Фролов С.В. Протективные свойства вакцины из штамма «Ла-Сота» при заражении цыплят вирулентным штаммом VII генотипа вируса ньюкаслской болезни. Ветеринария. 2015; 2: 28?31.

7.   Фролов С.В., Мороз Н.В., Чвала Ил.А., Ирза В.Н. Эффективность вакцин против ньюкаслской болезни производства ФГБУ «ВНИИЗЖ» в отношении актуальных вирусов VII генотипа. Ветеринария сегодня. 2021; 1 (36): 44?51.\

8. Guseva N.A. et al. Analysis of Avian Orthoavulavirus 1 Detected in the Russian Federation between 2017 and 2021 / N.A. Guseva, S.N. Kolosov, N.G. Zinyakov, A.V. Andriyasov, Renfu Yin, L.O. Scherbakova, E.V. Ovchinnikova, Z.B. Nikonova, D.B. Andreychuk, A.V. Sprygin, I.A. Chvala, N.V. Moroz // Vaccines. — 2023. — Vol. 11, No 6. — P. 1032.

9. Волкова М.А., Чвала И.А., Ярославцева П.С., Кулагина М.А., Осипова О.С., Гусева Н.А., Андрейчук Д.Б. Серологический мони- торинг ньюкаслской болезни в Российской Федерации в 2023?2024 гг. Ветеринария сегодня. 2025; 14(4): 391?400.

10. Peck K.M., Lauring A.S. Complexities of Viral Mutation Rates. J Virol. 2018 Jun 29; 92(14): e01031-17.

11. Schloer G.M., Hanson R.P. Relationship of plaque size and virulence for chickens of 14 representative Newcastle disease virus strains. J Virol. 1968; 2(1): 40?47.

12. Sardjono B. Plaque assay of Newcastle disease virus. Bul Penelit Kesehat. 1989; 17(2): 207?215.

13. Khabiri A., Toroghi R., Mohammadabadi M., Tabatabaeizadeh S.E. Introduction of a Newcastle disease virus challenge strain (sub-genotype VII.1.1) isolated in Iran. Vet Res Forum. 2023; 14(4): 221?228.

14. Cardenas-Garcia S., Diel D.G., Susta L. et al. Development of an improved vaccine evaluation protocol to compare the efficacy of Newcastle disease vaccines. Biologicals. 2015; 43(2): 136?145.

15. Bulbule N.R., Madale D.S., Meshram C.D., Pardeshi R.B., Chawak M.M. (2015). Virulence of Newcastle Disease Virus and Diagnostic Challenges. Adv. Anim. Vet. Sci. 3(5s): 14?21.

16. Yang H.M., Zhao J., Xue J., Yang, Y.L., Zhang G.Z. Antigenic variation of LaSota and genotype VII Newcastle disease virus (NDV) and their efficacy against challenge with velogenic NDV. Vaccine 2017; 35: 27?32.

17. Dewidar A.A.A., Kilany W.H., El-Sawah A.A., Shany S.A.S., Dahshan A.M., Hisham I., Elkady M.F., Ali A. Genotype VII.1.1-Based Newcastle Disease Virus Vaccines Afford Better Protection against Field Isolates in Commercial Broiler Chickens. Animals (Basel). 2022 Jun 30; 12(13): 1696.

18. Cornax I., Miller P.J., Afonso C.L. Characterization of live LaSota vaccine strain-induced protection in chickens upon early challenge with a virulent Newcastle disease virus of heterologous genotype. Avian Dis. 2012 Sep; 56(3): 464?70.

19. Rweyemamu, M.M., Pay, T.W. & Parker, M.J. (1976). Serological differentiation of foot-and-mouth disease virus strains in relation to selection of suitable vaccine viruses. Dev Biol Stand 35, 205?4.

Количество показов: 65
Автор:  УДК: 619:616.98:578.831.11:616- 036.22 Т. Зыбина, А. Пяткина, Н. Мороз, В. Кулаков, ВНИИЗЖ