Ветеринария

АвиФлуВак — гарантия защиты от высокопатогенного гриппа птиц А 07.10.2024

АвиФлуВак — гарантия защиты от высокопатогенного гриппа птиц А

Возбудителями гриппа являются РНК- содержащие вирусы, которые относятся к семейству Orthomyxoviridae, подразделенные на монотипные роды (Influenzavirus: А, B, C и D). Дифференциация на подтипы построена на основе структуры внешних вирусных белков гемагглютинина (Н) и нейроминидазы (N). Вирус гриппа А имеет 16 подтипов гемагглютинина (H1–16) и 9 подтипов нейраминидазы (N1–9).

Все высокопатогенные штаммы птичьего гриппа (ВПГП) относятся к подтипам H5 или H7. Для домашней птицы вирус ВПГП — это один из наиболее опасных инфекционных агентов. Патогенез заболевания определяется стремительной генерализацией инфекционного процесса, тотальным поражением микроциркуляторного русла и центральной нервной системы птицы. Клинически это сопровождается слизистыми истечениями из носовой полости, синюшностью гребня и сережек, подкожными геморрагиями, отечностью шеи и головы, помутнением роговицы глаз (рис. 1). Наблюдаются запрокидывания головы и параличи крыльев и ног. Гибель может наступить менее чем через 24 часа после заражения. Летальность достигает 100%.

Некоторые клинические признаки ВПГП

Рис. 1. Некоторые клинические признаки ВПГП

Произошедшие в последние годы разрушительные эпизоотии были обусловлены распространением вируса ВПГП (H5N1). Основные убытки птицеводческих предприятий были связаны с падежом и вынужденным забоем птицы. Например, во Франции в 2022 г. в результате противоэпизоотических мероприятий было уничтожено 11 млн птиц, в США к сентябрю 2022-го потери превысили 20 млн голов [1; 2]. Всего в 2022 г. 67 стран на пяти континентах сообщили о вспышках ВПГП (H5N1), что привело к потере более 131 млн голов домашней птицы [3]. В период апрель–июнь 2023 г. вспышки вируса ВПГП (H5N1) имели место в 25 странах Европы у домашних и диких птиц [4]. За период с начала 2024 г. на территориях трех субъектов РФ (в Белгородской, Воронежской и Астраханской областях) зарегистрировано четыре случая возникновения ВПГП, в том числе три — на крупных птицеводческих объектах [5].

Глобальное распространение гриппа — это следствие уникальных особенностей возбудителя. Вирусная РНК на этапе синтеза в инфицированной клетке не имеет механизма репарации и сохраняет все возможные «ошибки» структуры, которые с вероятностью не менее чем 1/106 воплощаются в изменения фенотипа вируса [6]. Это могут быть изменения антигенных свойств и/или изменения тропизма возбудителя. В первом случае измененный агент может уклониться от иммунного ответа организма, во втором — может повысить вирулентность. Важно отметить, что геном вируса представлен независимыми фрагментами РНК (8 фрагментов). При инфицировании одной клетки различными вариантами вируса может произойти рекомбинация — обмен фрагментами генома, что приведет к качественным изменениям свойств возбудителя, вплоть до изменений видового спектра патогенности. Очевидно, что перечисленные особенности объясняют уникальный экологический портрет вируса гриппа А (рис. 2).

Экология вируса гриппа А

Рис. 2. Экология вируса гриппа А [7]. Обозначены варианты гемагглютинина (Н) нейраминидазы (N). Черными стрелками показаны ниши циркуляции возбудителя, серыми — направления распространения инфекции

Некоторые важные официальные сообщения:

–   Число случаев заболевания людей на 2013 г. вирусом гриппа Н5N1 в 15 странах составило 602 человека, из которых 355 погибли [8].

–   В Китае на 2021 г. вирусом H7N9 заболели 1600 человек, из них 615 умерли [9].

–   В 2024 г. в США антиген вируса H5N1обнаружен в образцах молочных желез и пробах непастеризованного молока коров. Местные кошки, которые пили инфицированное молоко, погибли с признаками тяжелого менингоэнцефалита [10].

–   В июле 2023 в прибрежных районах Норвегии и Финляндии ВПГП стал причиной гибели десятков тысяч чаек [https://www.reuters.com/world/ europe/norway-finland-battle-rapid-spread-bird- flu-2023-07-28/].

Кроме   предупредительных   ветеринарно-санитарных мер, надежным способом борьбы с ВПГП является специфическая профилактика болезни. В настоящее время наиболее распространенными вакцинами против гриппа птиц являются инактивированные цельновирионные препараты, которые с успехом применяются во многих странах мира. Главные условия эффективности указанных вакцин — гомология антигенов вакцинного и полевого вирусов и достаточное количество антигена для обеспечения напряженного иммунитета. При этом из соображений эпизоотической безопасности целесообразно, чтобы производственный вирус не являлся высоковирулентным вариантом.

В 2022 г. в ФГБУ «ВНИИЗЖ» была завершена разработка и регистрация инактивированной эмульсионной вакцины против гриппа птиц (H5) АвиФлуВак на основе антигена низкопатогенного вируса гриппа птиц (НГП) подтипа Н5N1 штамма Ямал, выделенного в 2021 г. на территории Ямало-Ненецкого автономного округа РФ.

Технологический процесс производства вакцины АвиФлуВак построен в соответствии с положениями «Правил надлежащей производственной практики» (GMP), принятых Решением Совета Евразийской экономической комиссии от 03.11.2016 № 77 (ред. от 14.07.2021), что обеспечивает получение качественного препарата.

Все технологические операции выполняются в аттестованных помещениях, имеющих соответствующие классы чистоты (стерильности). Выходной контроль вакцины (контроль готовой продукции) основан на рекомендациях, изложенных в Manual of Diagnostic Test and Vaccines for Terrestrial Animals 2021 (Chapter — 3.3.4. Avian Influenza, Including Infection with High Pathogeniciti Avian Influenza Viruses). Показатели качества препарата (характеристики и нормативы) закреплены в стандарте на вакцину (СТО 00495527-0406-2022). Каждая серия вакцины сопровождается паспортом (рис. 3).

Вакцина АвиФлуВак


Рис. 3. Вакцина АвиФлуВак


Рассмотрим некоторые иммунологические показатели вакцины АвиФлуВак. Развитие поствакцинального гуморального иммунного ответа птицы показано на диаграмме (рис. 4). 

Динамика поствакцинального гуморального иммунного ответа цыплят, привитых вакциной АвиФлуВак


Рис. 4. Динамика поствакцинального гуморального иммунного ответа цыплят, привитых вакциной АвиФлуВак.

Приведены групповые оценки (медианы) логарифмических титров антител к вирусу гриппа (Т, log2), установленные в РТГА соответственно времени после вакцинации (сут.). Ось абсцисс пересекает ось ординат в точке Т=7log2. Данная величина принята в качестве протективного титра [11]

Из данных диаграммы следует, что достижение необходимой напряженности поствакцинального иммунитета птицы против гриппа (достижение протективного уровня антител) наблюдали приближенно через 16 суток после вакцинации.

Вакцина АвиФлуВак многократно испытывалась в «острых» опытах, где иммунизированные птицы подвергались заражению высокопатогенными штаммами вируса (ВПГП), которые были выделены на территории РФ. Были испытаны штаммы подтипа Н5N1 А/chicken/Primorsky/85/08 (в тексте — ВГП Н5N1 штамм Приморский); подтипа Н5N8 A/duck/ KChR/1590-20/20 (в тексте — ВГП Н5N8 штамм КЧР); подтипа Н5N1 A/gull/Kirov/998-1/2023 (в тексте — ВГП Н5N1 штамм Чайка).

В качестве референта в экспериментах была использована коммерческая вакцина на основе антигена ВПГП H5N1. Защищающую (протективную) способность вакцин испытывали с разными концентрациями (дозами, D) соответствующих антигенов. Для испытания  каждой  дозы использовали группу из n-числа вакцинированных птиц. После заражения в каждой группе по истечении 10 суток определяли индекс защиты Р=1–L/n, где L — число клинически больных и погибших за период наблюдения птиц. Значения Р преобразовывали в эквиваленты по Берксону: f=log(Р/(1–Р)), позволяющие зависимость f от lgD приблизить к линейному виду [12, c. 267]. При этом значения Р=1 принимали как ‘Р=1–1/5n [13, с. 246]. Полученные результаты представлены в табл. 1.

Таблица 1

Показатели протективного действия вакцин, 
содержащих различные дозы антигенов вируса НПГП и ВПГП, против штаммов ВПГП

Штамм-пробойник

Иммунизирующий антиген

Доза антигена (D)

Индекс защиты (Р)**

Эквивалент индекса защиты f=log (Р/(1–Р)

ВПГП Н5N1 шт. Приморский

НПГП Н5N1 шт. Ямал

1*

20/20 (‘Р=0,99)***

1,996

1/25

6/20 (P=0,3)

–0,368

1/50

5/20 (P=0,25)

–0,477

Контроль

не вакцинировали

0/10 (P=0)

н/о

ВПГП Н5N8 шт. КЧР

НПГП Н5N1 шт. Ямал

1

9/9 (‘P=0,98)

1,690

1/25

9/9 (‘P=0,98)

1,690

1/50

6/9 (P=0,67)

0,308

1/100

5/9 (P=0,56)

0,105

Контроль

не вакцинировали

0/10 (P=0)

н/о

ВПГП Н5N1 шт. Чайка

НПГП Н5N1 шт. Ямал

1

17/17 (P=0,99)

1,996

1/25

9/10 (P=0,90)

0,954

1/50

6/10 (P=0,60)

0,176

1/100

4/10 (P=0,40)

–0,176

Контроль

не вакцинировали

0/10 (P=0)

н/о

ВПГП Н5N1 шт. Чайка

ВПГП Н5N1

1

10/10 (‘P=0,98)

1,690

1/25

7/10 (P=0,70)

0,368

1/50

3/10 (P=0,30)

–0,301

1/100

3/10 (P=0,30)

–0,301

Контроль

не вакцинировали

0/10 (P=0)

н/о

Использовали  регрессионный анализ. Оценивали титр 50%-ных протективных доз (PD50), содержащихся в стандартном прививном объеме препарата. Величины PD50, установленные соответственно иммунизирующим антигенам в составе испытанных вакцин и использованных штаммов пробойников, приведены в табл. 2.

Таблица 2

Величины PD50, установленные соответственно

Штамм-пробойник

Вакцина (иммунизирующий антиген)

D50

ВГП Н5N1

шт. Приморский

АвиФлуВак (НПГП Н5N1 шт. Ямал)

19,2

ВГП Н5N8

шт. КЧР

АвиФлуВак (НПГП Н5N1 шт. Ямал)

358,9

ВПГП Н5N1

шт. Чайка

АвиФлуВак (НПГП Н5N1 шт. Ямал)

96,0

ВПГП Н5N1

шт. Чайка

Коммерческая вакцина (ВПГП Н5N1)

38,1

Важно отметить, что вакцина АвиФлуВак (на основе антигена вируса НПГП Н5N1 штамма Ямал) явно не уступает своему коммерческому аналогу и способна защитить птицу от разных вариантов вирусов ВПГП, в том числе от актуального на данный момент для РФ вируса ВПГП Н5N1 штамма Чайка.


Литература

1.   Avian influenza (including infection with pathogenicity avian influenza viruses) // WOAH. Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals. Chapter 3.3.4. Режим доступа: https://www.oie.int/fileadmin/Home/eng/Health_standards/ tahm/3.03.04_AI.pdf (дата обращения: 28.02.2022).

2.   Зиняков, Н. Г. Анализ маркерных замен изолята вируса гриппа A/chicken/Astrakhan/2171-1/2020 H5N8, выделенного на территории Астраханской области / Н. Г. Зиняков, А. В. Андриясов, Е. В. Овчинникова, А. А. Козлов, П. Д. Жестков, Д. Б. Андрейчук, И. А. Чвала // Ветеринария сегодня. — 2021. — № 2. — С. 132–137. DOI: 10.29326/2304-196X-2021-2- 37-132-137.

3.   Zecchin, B. Evolutionary dynamics of H5 highly pathogenic avian influenza viruses (clade 2.3.4.4B) circulating in Bulgaria in 2019–2021 / B. Zecchin, G. Goujgoulova, I. Monne, A. Salviato, A. Schivo, I. Slavcheva et al. // Viruses. 2021; 13 (10):2086. DOI: 10.3390/v13102086.

4.   World Health Organization. Antigenic and genetic characteristics of zoonotic influenza A viruses and development of candidate vaccine viruses for pandemic preparedness = Caractéristiques génétiques et antigéniques des virus grippaux A zoonotiques et mise au point de virus vaccinaux candidats pour se préparer à une pandémie. Weekly Epidemiological Record = Relevé épidémiologique hebdomadaire. 2021; 96 (12): 88–104. Режим доступа: https://apps.who.int/iris/handle/10665/340335.

5.   Официальные ресурсы администрации Республики Крым. [https://simfmo.rk.gov.ru/articles/bb73ff3b-7808-4a49-bd5d- 03bc6b96148f].

6.    Suárez, P. Heterogeneity of the mutation rates of influenza A viruses: isolation of mutator mutants / P. Suárez, J. Valcárcel, J. Ortín // J Virol. 1992 Apr; 66(4):2491–4.

7.   Long, Jason S. Host and viral determinants of influenza A virus species specificity / Jason S. Long, Bhakti Mistry, Stuart M. Haslam, Wendy S. Barclay // Nat Rev Microbiol. 2019. 17, 67–81. Режим доступа: https://www.nature.com/articles/s41579- 018-0115-z?error=cookies_not_supported&code=6cc80333-43b1-4349-b44b-1f49ed77e995.

8.   Каверин, Н. В. Антигенная структура гемагглютинина вируса гриппа А / Н. В. Каверин, И. А. Руднева, Т. А. Тимофеева, А. В. Игнатьева // Вопросы вирусологии. — 2012. — №S1. Режим доступа: https://cyberleninka.ru/article/n/antigennaya- struktura-gemagglyutinina-virusa-grippa-a (дата обращения: 02.09.2024).

9.   Treshchalina, A. Substitution Arg140Gly in Hemagglutinin Reduced the Virulence of Highly Pathogenic Avian Influenza Virus H7N1 / A. Treshchalina, Y. Postnikova, E. Boravleva, A. Gambaryan, A. Belyakova, A. Ishmukhametov, G. Sadykova, A. Prilipov,

N. Lomakina // Viruses. 2021 Aug 11;13(8):1584.Режим доступа: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC8402889.

10.FAO, WHO, WOAH. 2024. Updated joint FAO/WHO/WOAH assessment of recent influenza A(H5N1) virus events in animals and people — 18 July 2024. Rome, Geneva, Paris. Режим доступа: https://openknowledge.fao.org/items/e05bf73b-793e-43e2- b79b-15a26cd2488b.

11.Swayne, D. E. Laboratory methods for assessing and licensing influenza vaccines for poultry / D. E. Swayne // Spackman E. (ed) Animal influenza virus (3nd edition), methods Mol. Biol., 2020. Vol. 2123. Humana Press, New York, pp. 211–225. Режим доступа: https://link.springer.com/protocol/10.1007%2F978-1-0716-0346-8_16?.

12.Ван дер Ваден, Б. Л. Математическая статистика / Б. Л. Ван дер Ваден. — Москва : Издательство иностранной литературы, 1960. — 434 с. Режим доступа: https://www.studmed.ru/van-der-varden-vl-matematicheskaya-statistika_5edc08a882c.html.

13.Урбах, В. Ю. Статистический анализ в биологических и медицинских исследованиях / В. Ю. Урбах. — Москва : Медицина; 1975. — 297 с. Режим доступа: https://www.studmed.ru/urbah-vyu-statisticheskiy-analiz-v-biologicheskih-i- medicinskih-issledovaniyah_732e15c6942.html.

______________________________________________________________________

1 Источник: https://russkie-perepela.ru/pticij-gripp-u-kur-simptomy-i-lecenie-profilaktika/

2 Источник: https://chtoikak.ru/ptichij-gripp-h5n1.html

3 Источник: https://pharmindustria.com/projects/atlas-opredeleniya-bolezney-ptiz/ptichiy-gripp/




Количество показов: 286
Автор:  Н. Мороз, канд. вет. наук, зав. лабораторией (e-mail: moroz@arriah.ru); С. Фролов, канд. вет. наук, ведущий научный сотрудник; В. Кулаков, канд. вет. наук, ведущий научный сотрудник, лаборатория профилактики болезней птиц, ФГБУ «ВНИИЗЖ», г. Владимир

Возврат к списку


Материалы по теме: